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Gal7是半乳糖凝集素的一种,在血液学、免疫学和肿瘤研究等领域具有重要的意义。本实验旨在了解GAL7的生物学特性及临床应用价值;同时探讨了ELISA试剂盒对检测GAL7的影响。
结果显示:不同批号的试剂盒均可以准确测定人半乳糖凝集素7,且其敏感度和特异度均较高;但使用不同批号试剂时,ELISA曲线下面积存在一定的差异性,说明不同批号试剂可能对检测结果有一定影响;另外,当使用不同的稀释剂进行稀释后测得的值也略有差异。因此建议采用同一批次或同一品牌的ELISA试剂进行操作和评价。
(1)仪器:美国MilliporeELISAGC-全自动酶免分析系统;
(2)试剂:1×50μlLC-HPLC专用血清,1×ulCP-40E胶体金标记抗球蛋白IgG抗体;1×ulCP-40E胶体金标记单克隆抗体的杂交瘤细胞悬液;
(3)操作方法:将待检样品用无菌注射器吸取至50μlLC-HPLC专用血清中并混匀后置于37°C水浴箱内孵育30min左右取上清液2滴于试管中加1mlHCl使呈碱性反应后再加入1mollNaOH溶液5mL充分混合后用0.45μm滤膜过滤弃去未结合的Na+离子;
(4)结果计算:
(1)灵敏度=(对照品浓度)-标准品浓度/标准品浓度;
(2)特异性=(试验组浓度)/(对照品);
(3)平均回收率=试验组与参照组的平均值/试验组数。
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